Aktuelles: So beginnt die Herstellung ribosomaler RNA

Alle h?heren Organismen haben es: Das Enzym RNA Polymerase I (Pol I). Es ist dafür zust?ndig, die sogenannte ribosomale RNA (rRNA) herzustellen. Dazu schreibt Pol I eine bestimmte DNA-Sequenz ab – und zwar au?erordentlich effizient. Die hergestellte rRNA wird sp?ter zum essenziellen Bestandteil der Proteinfabriken der Zelle (Ribosome). Damit ist Pol I ein zentraler Spieler in der Regulation des Wachstums aller Zellen. Deshalb m?chte die Arbeitsgruppe für Strukturelle Chemie an der Universit?t Regensburg herausfinden, wie Pol I funktioniert, wie sie rekrutiert und reguliert wird. Nun ist es der Arbeitsgruppe um Prof. Dr. Christoph Engel gelungen, einen frühen ?bergangszustand der Pol I zu stabilisieren und seine Struktur auf molekularer Ebene zu bestimmen. Die Ergebnisse wurden in der Fachzeitschrift Nature Communications ver?ffentlicht.

Die Struktur zeigt, wie eine native DNA-Sequenz von Proteinen des ‘Core Factor‘ erkannt wird. Durch die Erkennung kann Pol I hochspezifisch rekrutiert werden und direkt mit der Herstellung von rRNA begonnen werden. Um diese Pol I Aktivit?t zu erm?glichen, muss doppelstr?ngige DNA zuerst in ihre Einzelstr?nge getrennt (d. h. geschmolzen) werden. Die Regensburger Wissenschaftler fanden heraus, dass sich die Mechanismen der Rekrutierung von Pol I und des Schmelzens der DNA grundlegend von verwandten Systemen unterscheiden. Biochemische Analysen der DNA-Bindungsst?rke des Core Factors und der spezifischen Aktivit?t der Pol I untermauern diese Vermutung. Des Weiteren haben sich strukturelle Elemente im Core Factor entwickelt, die anscheinend zur erfolgreichen DNA-Schmelzung beitragen. Folglich konnten die Biochemiker zeigen, dass eine Entfernung dieser Elemente im Core Factor dazu führt, dass Pol I ihre Aufgabe nicht mehr ausführen kann. Abschlie?end hat eine vergleichende Strukturanalyse ergeben, dass es w?hrend der Rekrutierung zur Kontraktion des Enzyms Pol I kommt. {web_name}e Kontraktion drückt doppelstr?ngige DNA praktisch zusammen und unterstützt dadurch die Trennung der beiden Einzelstr?nge voneinander. Ein ?hnlicher Mechanismus bleibt verwandten Enzymen aufgrund ihrer strukturellen Eigenheiten verwehrt. Die Forscher gehen deshalb davon aus, dass sich Pol I im Laufe der Evolution spezifisch an ihre Aufgabe angepasst hat und daher ?u?erst effizient agieren kann.

Dank dieser Ergebnisse k?nnen die Wissenschaftler nun neue mechanistische Fragestellungen bearbeiten. Beispielsweise: Wie wird festgelegt, an welche DNA-Sequenzen Core Factor und damit Pol I rekrutiert werden? Und: Was ist die Rolle von regulatorischen Proteinen und deren Modifikationen? Zus?tzlich zur Grundlagenforschung erfolgen Bemühungen, Pol I künstlich gezielt zu hemmen. Da vor allem schnell wachsende Zellen, wie z. B. Krebszellen, eine hohe Pol I Aktivit?t aufweisen, wird eine chemotherapeutische Nutzung solcher Strategien derzeit getestet. Die Analysen der Biochemiker k?nnen diese Bestrebungen nun mit Erkenntnissen auf struktureller Ebene unterstützen.


?ber die Arbeitsgruppe für Strukturelle Biochemie
Die Arbeitsgruppe für Strukturelle Biochemie ist die erste Tenure-Track Professur an der Universit?t Regensburg und benutzt modernste Methoden der Einzelmolekülanalyse mittels kryo-Elektronenmikroskopie zur 3D-Visualisierung der Pol I in Aktion. Ihre Ergebnisse validieren die Biochemiker durch traditionelle Techniken der funktionellen Biochemie um damit ein Gesamtbild der Struktur-Funktionsbeziehungen komplexer molekularer Maschinen zu erlangen. Dafür wird die Gruppe vom Emmy-Noether Programm der Deutschen Forschungsgemeinschaft gef?rdert und ist Teil des Sonderforschungsbereichs 960 der Fakult?t für Biologie und Vorklinische Medizin. Weitere Informationen finden Sie unter /biologie-vorklinische-medizin/strukturelle-biochemie/ (externer Link, ?ffnet neues Fenster)

ORIGINALPUBLIKATION:

Pilsl M and Engel C, Structural basis of RNA polymerase I pre-initiation complex formation and promoter melting. Nature Communications 2020.
DOI: 10.1038/s41467-020-15052-y

WEITERF?HRENDE LINKS

• Structural basis of RNA polymerase I pre-initiation complex formation and promoter melting
• Arbeitsgruppe Strukturelle Biochemie